两种消毒剂对规模化鸭场种蛋消毒效果的对比试验

摘要 使用两种不同消毒剂消毒种蛋，检测消毒前后种蛋表面活菌数、大肠菌群及沙门氏菌的变化情况，消毒后记录种蛋孵化成绩。结果表明：甲醛熏蒸消毒及百毒杀喷雾消毒均能使种蛋表面活菌数有效减少（P＞0.05），但对大肠菌群和沙门氏菌检出率甲醛组均高于百毒杀组，各消毒组与对照组相比均能使大肠菌群最近似数（MPN）显著降低（P<0.01），消毒组间差异不显著（P＞0.05）；百毒杀组消毒后受精蛋孵化率高于甲醛组（P＜0.05）。百毒杀喷雾消毒优于甲醛熏蒸消毒。

关键词 种蛋；消毒；甲醛；百毒杀

中图分类号 S859.79+9.1文献标识码A文章编号1007-5739（2008）07-0169-02

大肠菌群主要来源于人畜粪便，而沙门氏菌寄生于动物肠道，随粪便排出体外，蛋从鸭体产下后易被这2种菌污染。因此，入孵种蛋一般都要经过消毒处理，消毒效果好坏，直接影响种蛋的孵化率。笔者进行了百毒杀喷雾与甲醛熏蒸对种蛋的消毒效果对比试验，现报告如下。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1消毒剂。甲醛、高锰酸钾，北京顺义众有化工厂生产；百毒杀，上海经纬化工有限公司生产。

1.1.2培养基。普通营养琼脂（牛肉膏5g，蛋白胨20g，NaCl 5g，琼脂20g，蒸馏水1 000mL，pH值7.4~7.6，115℃灭菌15min备用）；乳糖胆盐发酵培养基、伊红美蓝培养基、乳糖发酵培养基、缓冲蛋白胨水、氯化镁孔雀绿增菌液、SS琼脂、三糖铁琼脂、各种生化培养基，购自于广东环凯微生物科技有限公司。沙门氏菌属诊断血清，购自于卫生部兰州生物制品研究所，批号：810003。

1.1.3种蛋来源。从四川克里莫公司引进全白羽奥白星种鸭雏苗1.09万羽，由德阳市旌阳区天元镇白鸽村种鸭场饲养，种蛋为42周龄种鸭所产蛋8 630枚。

1.2方法

1.2.1试验分组。将种蛋分成3组，一组4 300枚，为试验Ⅰ组；另一组4 330枚，为试验Ⅱ组，消毒前种蛋为对照组。试验Ⅰ组采用甲醛（福尔马林10mL/m3+高锰酸钾5g/m3）对种蛋熏蒸消毒15min，试验Ⅱ组采用百毒杀（按1∶1 000配制）对种蛋进行喷雾消毒。

1.2.2活菌数的测定。消毒前及消毒后各组各取种蛋6枚（每组随机取样）。取一铁皮，中间制成5cm²大小正方形空洞，轻放于所取种蛋表面，用灭菌棉签在空洞中的种蛋表面来回擦试20次，每个种蛋做2个重复。剪下棉签头浸入装有20mL灭菌生理盐水试管中，充分混合后取1mL至普通营养琼脂培养基培养24h，观察菌落数。计算每组6个种蛋12个样本1cm²种蛋表面所含活菌数[1-3]。

1.2.3大肠菌群最近似数（MPN）的测定。将各试管中混合的生理盐水作为检测样品，根据《水和废水监测分析方法（第四版）》中的“水中总大肠菌群的测定多管发酵法”对样品进行检测[4]，计算种蛋表面1cm²所含大肠菌群最近似数。

1.2.4沙门氏菌增菌培养。根据《水和废水监测分析方法（第四版）》中的“水中沙门氏菌属的测定”对检测样品进行沙门氏菌增菌培养[4]。

1.2.5种蛋孵化。各组同时同机入孵，孵化条件完全一致，孵化至第8天照蛋1次，统计无精蛋、死精蛋数。孵化结束时统计各组出雏数和受精蛋孵化率。

2结果与分析

2.1蛋壳表面活菌、大肠菌群、沙门氏菌检测结果

对照组：1cm²蛋壳上活菌数（以log10n表示，x±s，下同），大肠菌群最近似数为6.88±1.38、1.08±0.67，活菌数、大肠杆菌群、沙门氏菌检出率分别为100%、100%、41.7%。

试验Ⅰ组：1cm²蛋壳上活菌数、大肠菌群最近似数为2.03±0.93、-1.15±1.07，活菌数、大肠菌群、沙门氏菌检出率分别为100%、16.7%、8.3%。

试验Ⅱ组：1cm²蛋壳上活菌数、大肠菌群最近似数为1.92±1.07、0，活菌数、大肠菌群、沙门氏菌检出率分别为100%、0、0。

从表1结果看，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组对细菌的杀灭效果明显，蛋壳上的活菌数有很大的减少。试验Ⅰ组和试验Ⅱ组各组与对照组的活菌数相比差异极显著（P＜0.01），试验Ⅰ组与试验Ⅱ组活菌数差异不显著（P＞0.05），试验Ⅱ组比试验Ⅰ组效果稍好。试验Ⅰ组与试验Ⅱ组MPN值与对照组MPN值差异极显著（P＜0.01），试验Ⅱ组与试验Ⅰ组差异不显著（P＞0.05），试验Ⅱ组消毒效果稍好于试验Ⅰ组。36个样本中对照组有5个样本检测出沙门氏菌。对照组有4个样本检测出沙门氏菌，试验Ⅰ组有1个样本检测出沙门氏菌，试验Ⅱ组未检测出沙门氏菌。消毒效果：试验Ⅱ组＞试验Ⅰ组。

经过沙门氏菌的增菌培养及生化鉴定，在蛋壳表面初步分离出1株肠炎沙门氏菌，生化鉴定结果见表2。

2.2受精蛋孵化结果

从表3的孵化效果看，试验Ⅱ组的平均孵化率为93.79%，要好于试验Ⅰ组的平均孵化率91.45%。经过检验，2组间受精蛋孵化率差异显著（P＜0.05）。

3讨论

（1）检查蛋壳带菌时，多将致病性微生物直接作为受粪便污染指标。但是，由于致病性微生物通过粪便污染到外界环境的数量相对较少，检测技术又比较复杂。因此，在实际工作中，要从自然环境中直接分离病原菌，并判定其污染程度作为常规检验，是非常困难也是难以做到的。目前，世界各国将“大肠菌群”作为粪便污染指示菌。Kehr、Butterfield和Geldreich等通过试验证明，大肠菌群与沙门氏菌存在一定的比例关系，因此对粪便污染样品的大肠菌群和沙门氏菌的检测具有广泛的公共卫生意义[5]。

（2）目前对大肠菌群最近似数的检测结果均以每100mL（g）的MPN表示，本次试验由于是对种蛋表面大肠菌群进行检测，因此以1cm²的MPN表示最终结果。

（3）从细菌检测结果可见，2种消毒剂均能有效杀灭种蛋表面细菌，使种蛋表面的活菌数、大肠菌群最近似数及沙门氏菌显著减少，百毒杀消毒液对细菌的杀灭能力要优于甲醛熏蒸；从种蛋孵化结果可见，肉鸭种蛋人孵前采用不同的消毒方法和消毒剂消毒，其受精蛋孵化率不同，采用百毒杀消毒液消毒种蛋孵化率优于甲醛熏蒸消毒，2组对比百毒杀喷雾消毒组孵化率提高了4.34%。这是因为粪便污染种蛋后，在蛋壳表面大量堆积，对通过蛋壳进入蛋内的细菌起到了一定的保护作用。甲醛熏蒸消毒时，由于穿透力差，作用不易达到深部，因此未能有效杀灭受污染种蛋表面细菌，在试验Ⅰ组（熏蒸组）中检测出的大肠菌群及沙门氏菌阳性种蛋皆为被粪便大量污染种蛋；而百毒杀消毒液能有效杀灭种蛋表面细菌，试验Ⅱ组（百毒杀喷雾消毒组）证实消毒后大肠菌群及沙门氏菌皆为阴性，在生产中建议推广应用[6-8]。

4参考文献

[1] 姚火春.兽医微生物学实验指导[M].北京：中国农业出版社，2001.

[2] 牛天贵.食品微生物学实验技术[M].北京：中国农业出版社，2002.

[3] 顾国平，奚晓春，瞿丽清，等.入孵前种蛋不同消毒方法的消毒效果及孵化成绩[J].中国家禽，2001，23（10）：25.

[4] 国家环境保总局《水和废水监测分析方法》编委会.水和废水监测分析方法（第四版）[M].北京：中国环境科学出版社，2002.

[5] 房海.大肠埃希氏菌[M].石家庄：河北科技出版社，1996.

[6] 霍泳东，徐仲仁，申细晚，等.百雷杀喷雾与福尔马林熏蒸对种蛋效毒效果的比较[J].2003，25（9）：21-22.

[7] 姬桂花.两种不同的消毒剂对肉鸡孵化卫生及孵化效果的影响[D].北京：中国农业大学，2004.

[8] 顾士圻.公共场所消毒杀灭实用技术[M].北京：中国石化出版社，2002.

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